(ингредиенты не имеют токсикологической характеристики)

Испытываются различные дозы на 3 видах животных. Каждая доза изучается на 6 половозрелы» животных, при введении перорально. Определяются дозы, не приводящие к летальному исходу (Д_>о) и вызывающие 100% гибель животных (ЛД_>100).

На основании данных летальных исходов методом Кербера или Литчфильд и Уилкоксона определяется средняя летальная доза (ЛД_>50). Описывается клиническая картина отравления и патологоанатомические изменения внутренних органов.

Б) Рецептура с одним из новых компонентов, не имеющим токсикологической характеристики. Проводится изучение нового компонента, не имеющего токсикологической характеристики, в объеме, указанном по пункту А. В случае умеренной токсичности этого компонента изучение острой токсичности пасты проводится на одном виде животных при введении им однократно 2—4 г (суточная доза для человека). Отсутствие летальных исходов животных является основанием для заключения о малой токсичности предлагаемой пасты.

В) Изменение количественных соотношений ингредиентов в пасте или сочетание ингредиентов, имеющих токсикологическую характеристику, но ранее в зубных пастах не применявшихся.

Изучение острой токсичности проводится на одном виде животных при введении им перорально 2—4 г (суточная доза для человека) испытуемой пасты. При отсутствии летальных исходов эта паста может быть отнесена к малотоксичному соединению. В последнее время стали использовать для этих целей куриные эмбрионы.

Исследование хронической токсичности. Проводится на двух видах животных (одним из видов обязательно должны быть морские свинки) при пероральном ежедневном введении в течение 6 месяцев 50 мг испытуемой пасты (из расчета 4 г для человека в сутки). Следует оценить возможное воздействие пасты: на морфологический состав периферической крови, функцию барьерных органов и органов выделения, изменение весовых коэффициентов всех внутренних органов и гистоморфологическую картину паренхиматозных органов.

А) Оценка локального раздражающего действия осуществляется:

■ На коже. Исследование проводят на кроликах белой масти массой от 2 до 4 кг. Предварительно готовят испытуемый раствор следующим образом: 2—4 г зубной пасты выдавливают из тубы в стерильный бокс и заливают 2—4 мл стерильного апирогенного изотонического раствора. Бокс закрывают притертой пробкой и помещают в термостат при 37°С на одни сутки. Испытуемым раствором в последующем считается полученная в боксе прозрачная надосадочная жидкость.

На спинке кроликов удаляют в 6 местах шерсть, а затем подкожно инъецируют в 3 местах испытуемый раствор с одной стороны, стерильный апирогенный изотонический раствор в 3 местах – с другой стороны. Через 30 минут после последней инъекции кроликам внутривенно вводят стерильно приготовленный фильтрованный 1% раствор трипанового синего в количестве 2 мл на 1 кг массы животного. Если по прошествии 60 минут интенсивность синей окраски на опытной стороне больше, чем на контрольной, то испытание следует повторить во избежание ошибки.

Зубная паста считается не обладающей раздражающим действием, если локально при первом и повторном испытании у кроликов интенсивность синей окраски в каждом из опытных мест превосходит самую сильную интенсивность синей окраски контрольных мест.

■ На слизистой оболочке глаз.

Исследование проводят на кроликах (от 2 до 6 голов), на которых за 2 дня до испытания был проведен тест на неповрежденность поверхности глаз при помощи стерильного раствора флюоресцеина натрия.

Испытуемым раствором считается надосадочная жидкость (2—4 г зубной пасты на 2—4 мл стерильного апирогенного изотонического раствора или стерильной апирогенной дистиллированной воды). В течение 2 дней по 10 раз в день с интервалами в 30 минут вводят по 2 капли надосадочной жидкости в опытный глаз, стерильного апирогенного изотонического раствора или апирогенной дистиллированной воды – в контрольный глаз. После каждого введения веки оттягивают в течение 30 секунд. После последней аппликации в опытный и контрольный глаз вводят одну каплю стерильного раствора флюоресцеина натрия (4% раствор на стерильном изотоническом растворе). Затем веки оттягивают по 30 секунд. По прошествии следующих 30 секунд глаза промывают стерильным изотоническим раствором, пока промывная жидкость не станет бесцветной.