Наконец, 29 ноября 1842 года свершилось то, чего уже давно жаждала благочестивая душа Александра: он был пострижен в монахи с именем Амвросий, в честь святителя Амвросия Медиоланского. В следующем, 1843 году брат Амвросий был рукоположен во иеродиакона, а спустя почти три года, достигнув надлежащего канонического возраста, – во иеромонаха.

Вскоре после священнического рукоположения Амвросия Оптину пустынь посетил епископ Калужский Николай. Побеседовав с новым иеромонахом (ему было тогда тридцать четыре года), преосвященный сказал отцу Амвросию: «А ты помогай отцу Макарию в духовничестве. Он уже стар становится. Ведь это тоже наука, только не семинарская, а монашеская».

Амвросий, как и подобает монаху, подчинился словам епископа. Теперь ему часто приходилось принимать посетителей, приходивших за духовным советом к старцу Макарию, сообщать старцу их вопросы и затем передавать вопрошающим ответы старца. Многому научился молодой иеромонах на этом послушании. Впоследствии этот опыт очень пригодился ему в его собственной духовнической практике.

Однако послушание у старца было неожиданно прервано тяжелой болезнью Амвросия. Еще в конце 1845 года, спеша в Калугу на собственное рукоположение по холодной зимней дороге, Амвросий сильно простудился. Болезнь затронула его внутренние органы, нанеся непоправимый вред здоровью. Около года после рукоположения молодой иеромонах еще держался, но затем острый приступ старой болезни приковал его к постели, сделав инвалидом на всю оставшуюся жизнь. Телесная немощь Амвросия была так велика, что он с трудом передвигался и более не мог совершать Божественную Литургию и исполнять другие священнические и монашеские послушания. Ему пришлось выйти за штат и до конца жизни числиться на иждивении обители. Питаться он мог теперь только протертой и жидкой пищей, при каждом движении покрывался испариной, так что ему приходилось менять одежду по нескольку раз в сутки, а любой сквозняк вызывал новый приступ болезни.

Конечно, человеку в расцвете лет тяжело бывает смириться с подобной беспомощностью. Однако Амвросий никогда не роптал на свою болезнь, а, напротив, благодарил за нее Господа. Почти прикованный к постели, не отвлекаемый повседневными попечениями, Амвросий смог глубже войти в себя, больше молиться и размышлять, учиться лучше понимать себя и других.

Впрочем, деятельная натура отца Амвросия даже «на одре болезни» не могла оставаться без практических занятий: Амвросий помогал старцу Макарию в издании святоотеческих творений, выполняя переводческую работу. Так, например, именно Амвросий перевел на общедоступный русский язык знаменитую «Лествицу» преподобного Иоанна Лествичника.

Под мудрым руководством старца Макария постигал Амвросий и искусство умной молитвы и, несмотря на свои молодые годы, вскоре достиг больших духовных высот. Это, как некогда успехи в учебе, могло бы заставить молодого иеромонаха возгордиться, но Макарий, как опытный духовный воспитатель и врач, заботливо следил за духовным ростом своего ученика и не давал ему уклониться в сторону от спасительного пути. Старец очень любил и уважал Амвросия, но для его же духовной пользы мог быть с ним и строг. Как-то раз один из посетителей кельи Макария попытался «заступиться» за ученика, которому старец только что сделал строгое замечание: «Батюшка, он человек больной!» Старец на это ответил: «А я разве хуже тебя знаю? Но ведь выговоры и замечания монаху – это щеточки, которыми стирается греховная пыль с его души, а без сего монах заржавеет». Сам Амвросий был благодарен своему наставнику за его строгость, понимая, как она необходима для хранения души от погибельной гордыни и воспитания монашеских добродетелей.