Дальнейшие исследования

К 1950-м годам исследования in vitro показали, что ROS вырабатываются внутри клетки. Используя электронный спиновый резонанс (ESR), Commoner et al. (1954) опубликовали первое прямое доказательство того, что свободные радикалы вырабатываются в живых клетках. Они также обнаружили, что уровни свободных радикалов были выше в тканях, которые были более метаболически активны. Впоследствии, в 1956 году, Harman опубликовал Свободнорадикальную теорию старения. Он объединил доказательства из исследования ESR, постхиросимских исследований радиационного повреждения (Hempelmann and Hoffman, 1953), выводы Фентона (Fenton, 1894) и современные теории, которые предлагали свободные механизмы окисления органических соединений и дисмутации перекиси водорода солями железа (Uri, 1952).

Harman предположил, что физиологическое железо и другие металлы будут вызывать образование ROS в клетке посредством химии Хабера-Вайса в качестве побочного продукта нормальных окислительно-восстановительных реакций. ROS повредит близлежащие структуры, включая ДНК, что в свою очередь вызовет мутации. Он предсказал, что введение соединений, которые легко окисляются, таких как цистеин, замедлит процесс старения.