После возвращения двух каравелл, Айлон начал подготовку к заселению новых земель. Он потратил значительные собственные средства и влез в долги, снаряжая экспедицию. Была сформирована эскадра из шести судов, на борту которых было около 600 пассажиров и членов экипажей. Среди них было несколько женщин, детей и чернокожих рабов. Трюмы кораблей были заполнены необходимыми припасами на несколько месяцев, там же разместили лошадей, коров, овец и свиней. Корабли отплыли из Испании в начале июля 1526 года. 9 августа 1526 года большая группа колонистов высадилась в заливе Винья (в 75 км к северо-востоку от современного Чарльстона). При этом один из кораблей повредил днище на каменистой отмели и затонул. Погибших не было, но значительная часть припасов была потеряна.

Айлон искал подходящее место для основания поселения на близлежащем острове Паулис, но почва была непригодной для земледелия, немногочисленное индейское население не давало надежд на прибыльную торговлю. Несколько разведывательных групп были отправлены на поиски более пригодных для расселения мест. Был обнаружен привлекательный участок, и Айлон решил переместиться примерно на 200 миль на юг к устью «мощной реки», вероятно, реки Сапело на территории современной Джорджии. В начале сентября колонисты перебрались на новое место и сразу же начали строить дома и церковь.

Место первоначальной высадки экспедиции Айлона (белая стрелка); предполагаемое место основанной де Айлоном колонии (красная стрелка), река Саванна (голубые стрелки)

Колония получила название Сан-Мигель-де-Гуальдапе. Это было первое европейское поселение на территории современных Соединенных Штатов. Наскоро построенный поселок просуществовал чуть более двух месяцев: поселенцы пережили холод, голод, болезни и конфликты с туземцами. 18 октября 1526 года Айлон умер, вероятно, как и Понсе де Леон стал жертвой индейской отравленной стрелы. После смерти лидера все предприятие развалилось. Колонисты подвергались частым атакам аборигенов, неся большие потери, умирали поддавшись нездоровому климату и распространившимся эпидемиям, а затем разбились на враждующие группировки и к середине ноября решили вернуться на Эспаньолу. Из 600 человек, которых Айлон привез на новую землю, только 150 выживших достигли Эспаньолы зимой 1526—1527 года.

***

В апреле 1528 года испанский конкистадор Панфило де Нарваэс во время экспедиции к западному побережью Флориды обнаружил залив Тампа, где он высадился вместе с отрядом из 300 человек.

За восемь лет до этого, в 1520 году Панфило де Нарваэс был отправлен в Мексику губернатором Кубы Диего Веласкесом де Куэльяром с целью остановить завоевание территорий Эрнаном Кортесом, которое не было санкционировано губернатором. На 19 кораблях разместили 900 солдат (в числе которых было 90 арбалетчиков и 70 человек, вооруженных аркебузами), 80 конных рыцарей и 20 пушек. Корабли отправились в море в начале апреля.

Сильный шторм потопил 6 из 19 кораблей, в результате чего погибло около 50 человек. Во время того же шторма несколько кораблей отстали от флота и поэтому высадка на мексиканское побережье производилась 20 апреля 1520 года по частям. Кортес в это время находился в ацтекской столице Теночтитлан (на месте нынешнего Мехико), будучи гостеприимно принятым императором ацтеков Монтесумой Вторым.

Сразу после высадки Нарваэс атаковал небольшой прибрежный гарнизон, но атака была безуспешной. В середине мая Кортес покинул Теночтитлан, чтобы разобраться с Нарваэсом. Нарваэс воспользовался численным превосходством своего войска и захватил город Семпоала.