Перед фиксацией мелкие, тонкие и легко деформирующиеся объекты необходимо поместить на кусочек плотной бумаги. Обезвоженные объекты помещают последовательно в следующие среды:

– жидкость Буэна для фиксации – 1 сут;

– короткая промывка в водопроводной воде – 1 – 15 мин;

– этанол 70 %-й – 1 сут;

– этанол 80 %-й – 1 – 7 сут;

– этанол 90 %-й – 1 сут;

– этанол 96 %-й – 1 сут;

– абсолютный этанол – 1 сут;

– абсолютный этанол-хлороформ 1: 1 – 2 – 3 ч;

– хлороформ (I) – 90 мин;

– хлороформ (II) – 90 мин;

– хлороформ-парафин (1: 1) в термостате при 37 °C – оставить на ночь (10 – 15 ч);

– парафин (I) в термостате при 56 – 58 °C – 1 ч;

– парафин (II) в термостате при 56 – 58 °C – 1 ч;

– парафин (III) в термостате при 56 – 58 °C – 1 ч.

Автоматизация процесса замещения промежуточных сред на парафин достигается использованием вакуумных процессоров (например, VIP 6, Sakura), в которых не только происходит автоматическая смена и перемешивание реактивов, но и создаются специальные условия для лучшей пропитки тканей реагентами.

По окончании проводки осуществляется заливка. Объект помещают в бумажную или подогретую в термостате специальную пластиковую (из полипропилена, полистирола и т. п.) или металлическую формочку. Далее в нее наливают свежую порцию разогретого до 58 – 65 °C парафина. Разогрев заливочного парафина свыше 56 °C рекомендуется в связи с возможностью быстрого застывания парафина, вынутого из термостата, что приводит к неравномерной заливке блока с сохранением пустот. В случае необходимости особой ориентации кусочка ткани при изготовлении срезов можно повернуть материал, обратив плоскость резки ко дну формочки, с помощью подогретых препаровальной иглы и глазного пинцета.

Конец ознакомительного фрагмента.