С началом большевистского мятежа Правительство предприняло настойчивые попытки по привлечению для борьбы с ним 1-го, 4-го и 14-го Донских полков. В ночь с 24 на 25 октября А. Ф. Керенский отдаёт приказ о направлении на подавление беспорядков находившиеся в столице донские полки: «Не теряя ни минуты, выступить на помощь Центральному Комитету Советов, революционной демократии, Временному правительству». Но казаки не поспешили выполнить данный приказ.

Утром 25 октября командиры всех трёх донских полков довели до сведения Правительства, что общим решением полковых комитетов казаки отказываются выступать на защиту Правительства без поддержки пехотных армейских частей, броневых автомобилей и пулемётов. Условие привлечения пехоты для совместных действий казаки выдвигали отнюдь не просто так. За этим скрывалась не чисто военная тактическая подоплека, а скорее политическая. Для казаков «пехота», состоявшая из крестьян и рабочих, являлась выразителем доминирующих политических взглядов и настроений большинства населения страны. Поэтому, говоря о возможности каких-либо действий в поддержку Правительства только совместно с пехотой, казаки присоединялись к воле народа, выразителем которой, по их мнению, могли служить солдаты.

Днём 25 октября в Зимний прибыла делегация казачьих полков. Министры А. И. Коновалов и Н. М. Кишкин уговаривали прибывших защищать Правительство. В ответ казаки вновь категорически заявили, что «ни один казак не выступит». На возобновившемся после этих безрезультатных переговоров заседании Временного правительства Коновалов сообщил о безуспешных попытках уговорить казаков. В эти тревожные часы по казармам казачьих полков ездили председатель Предпарламента Н. Д. Авксентьев, представители Правительства, безуспешно пытавшиеся уговорить казаков выступить на защиту Временного правительства.

Максимальные усилия с целью повлиять на позиции казаков прилагал Совет Союза казачьих Войск. На состоявшихся 25 октября в его помещении нескольких заседаниях присутствовали и специально приглашённые члены полковых комитетов 1-го, 4-го и 14-го Донских полков. Но, несмотря на все их увещевания, казаки однозначно заявили о нейтралитете всех трёх казачьих полков. Члены Совета Союза есаул Аникеев и прапорщик Худяков много раз приезжали в казармы донских полков, вели там переговоры, но выступления казаков без выдвинутых ими условий добиться не смогли. В такой ситуации Совет Союза казачьих Войск прибегнул даже к тому, что от своего имени направил специальное обращение проходившему в Киеве Общефронтовому казачьему Съезду с просьбой «при помощи резолюции Съезда опомнить казачьи полки в Петрограде».

Вечером 25 октября в 21 час 45 минут казаки трёх сотен 14-го Донского полка, находившихся на Дворцовой площади, поставили в известность членов Правительства о своём решении уйти в казармы.

Позиция донских казаков во время большевистского мятежа в столице, учитывая численность и уровень боевой подготовки красногвардейцев, практически нейтральная позиция основной массы солдат гарнизона, во многом непосредственно сказались на его ходе и отчасти на общих итогах. Не следует упускать из виду такие важные факторы, как значительные боевые возможности казачьих полков при пассивности подавляющего большинства солдатских частей. Так, по подсчётам известного зарубежного исследователя Р. Пайпса, в перевороте на стороне большевиков участвовали только 4% общего числа солдат столичного гарнизона. К тому же следует добавить, что это были солдаты запасных полков и батальонов, уровень военной подготовки и боевой дух которых были крайне низки. По свидетельству П. Н. Краснова, прибывший к нему из Петрограда сотник Карташов характеризовал столичный гарнизон как «не знающий, на чью сторону стать, держащий нейтралитет». Солдаты Петроградского гарнизона во время переворота заняли пассивную позицию, отсиживались в казармах и требовали от обеих сторон перехода к переговорам.